FastDigest 限制性内切酶

文章来源：最新促销  2026-04-14 11:04:57  0

FastDigest 限制性内切酶——Thermo Scientific

One buffer for 176 enzymes. It's that easy.

所有176种酶均使用一种统一缓冲液。酶切就是如此简单。

Thermo Scientific FastDigest 限制性内切酶是一套用于快速酶切的高级内切酶，具有如下优势：

在5-15分钟内完成酶切
缓冲液与下游应用100%兼容
酶切后可直接上样进行凝胶电泳

自即日起，所有FD系列内切酶进行65折促销！！

FastDigest 产品系列是目前业内最丰富的限制性内切酶产品系列之一。在酶学领域数十年的专业积累、丰富的同裂酶选择、由我们顶级生产设施提供的高纯度酶生产能力，共同助力打造出首款使用统一缓冲液体系的限制性内切酶系统。

FastDigest 限制性内切酶的优势

	FastDigest 限制性内切酶	传统限制性内切酶
缓冲液体系	一种统一缓冲液	多达20种缓冲液
双重/多重限制性酶切	无拘无束——所有176种酶均使用一种统一缓冲液，且在其中均具有100%活性	受缓冲液兼容性限制
反应时间	5-15分钟	1小时至过夜
酶切后可直接上样进行凝胶电泳	是	否
下游实验应用	100%兼容缓冲液	部分兼容
星号活性	否	是
活性定义	在 FastDigest 缓冲液中，1 μL FastDigest 酶可在5至15分钟内切割 1 μg 底物 DNA	在酶的最佳缓冲液中，1单位酶可在60分钟内水解 1 μg λDNA

缓冲液具有100%活性

FastDigest绿色缓冲液和Thermo Scientific FastDigest缓冲液是我们专利的酶切缓冲液，对所有FastDigest限制性内切酶都具有100%活性。该缓冲体系可利用任意限制酶组合实现双重和多重酶切。无需连续酶切或更换缓冲液。

5分钟内在FastDigest绿色缓冲液中完成单重、双重和三重酶切

5分钟质粒DNA酶切比较：

泳道 M：Thermo Scientific GeneRuler Express 分子量标准（货

泳道1：对照，未酶切的质粒 DNA

泳道2：FastDigest EcoRI

泳道3：FastDigest EcoRI和FastDigest KpnI

泳道4：FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI

缓冲液与下游实验应用100%兼容

DNA/RNA修饰酶，如连接酶、磷酸酶、激酶和嗜温DNA聚合酶在FastDigest和FastDigest绿色缓冲液中具有100％活性。因此，在下游应用中使用的酶可以直接加到FastDigest反应混合物中。不需要缓冲液更换或纯化步骤。

DNA/RNA 修饰酶	在FastDigest绿色缓冲液/FastDigest缓冲液中的活性
DNA 聚合酶 I，大肠杆菌	100%
Klenow 片段	100%
Klenow 片段 (exo-)	100%
T4 DNA 聚合酶	100%
T7 DNA 聚合酶	100%
T4 DNA 连接酶*	75–100%
FastAP 热敏碱性磷酸酶	100%
T4 多聚核苷酸激酶	100%

* T4 DNA连接酶活性需要0.5 mM ATP。

在5-15分钟内完成酶切

使用一种统一缓冲液在5-15分钟内完成双重和多重酶切：

节省时间和精力，提高酶切通量
所有种类的DNA模板都提供相应的酶切时间（质粒DNA、PCR产物、基因组DNA）。
所有模板都不需要酶切过夜。
反应时间短，无星号活性。

常规限制性内切酶连续酶切		FastDigest 限制性内切酶一种反应混合物
Apal的反应体系构建	约2分钟	FastDigest ApaI和XhoI的反应体系构建	约2分钟
孵育	60分钟	孵育	5分钟
Xhol的反应体系构建	约2分钟	—	—
孵育	60分钟	—	—
总时间	>2小时	总时间	7分钟

酶切后可直接进行凝胶电泳

基于方便性考虑，我们开发了FastDigest绿色缓冲液，其与FastDigest无色缓冲液具有同样的性能，但可将酶切反应混合物直接上样进行凝胶电泳。10X FastDigest绿色缓冲液包含密度试剂和两种示踪染料，从而可以实现直接上样电泳。蓝色染料在1%琼脂糖凝胶中的迁移率与3-5 kb DNA片段接近，并在424 nm时出现激发峰；而黄色染料在1%琼脂糖凝胶中的迁移速度稍快于10 bp DNA片段，并在615nm时出现激发峰。

FastDigest 绿色缓冲液

含有FastDigest Green绿色缓冲液的反应混合物：

泳道1：电泳前，上样至凝胶孔

泳道2：电泳后分离

反应时间短，无星号活性

FastDigest酶与FastDigest（绿色）缓冲液结合使用，以消除星号活性：

反应时间短（5-15分钟），无需长时间消化
统一缓冲液，具有适用于所有酶的最佳pH和盐浓度
优化的酶和甘油浓度

使用常规限制性内切酶，在较长的反应时间、高酶浓度和高甘油浓度、高 pH 值或低离子强度情况下，可能表现出星号或“松弛”活性。FastDigest 酶很好的解决了所有这些问题，可在5分钟内实现单重、双重甚至三重酶切，无任何星号活性出现。

5分钟内完成质粒DNA的单重和双重酶切，无星号活性迹象

5分钟质粒DNA酶切比较：

泳道1：FastDigest SmaI

泳道2：FastDigest EcoRI

泳道3：FastDigest SmaI 和 FastDigest EcoRI 双酶切

泳道 M：GeneRuler 1 kb Plus DNA 分子量标准（货

泳道 C：对照，未酶切的质粒 DNA

参考文献

应用	文献
使用 FastDigest EcoRI 和 BamHI 限制性内切酶制备 Golden Gate 克隆载体。	Wang T, Wang D, Lyu Y, et al.(2018) Construction of a high-efficiency cloning system using the Golden Gate method and I-SceI endonuclease for targeted gene replacement in Bacillus anthracis.J Biotechnol 271:8–16.
FastDigest BpiI (BbsI) Type IIS 型限制性内切酶用于构建 gRNA。	Kurata M, Wolf NK, Lahr WS, et al.(2018) Highly multiplexed genome engineering using CRISPR/Cas9 gRNA arrays.PLoS ONE 13(9):e0198714.
FastDigest TaaI 限制性内切酶用于 PCR 产品的 RFLP 分析。	Fong WY, Ho CC, Poon WT.(2017) Comparison of Direct Sequencing, Real-Time PCR-High Resolution Melt (PCR-HRM) and PCR-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) Analysis for Genotyping of Common Thiopurine Intolerant Variant Alleles NUDT15 c.415C>T and TPMT c.719A>G (TPMT*3C).Diagnostics (Basel) 7(2):27.
使用 FastDigest HindIII 限制性内切酶进行 ddPCR 前基因组 DNA的片段化。	Li B, Kaushik S, Kalinowski P, et al.(2018) Droplet digital PCR shows the D-Loop to be an error prone locus for mitochondrial DNA copy number determination.Sci Rep 8(1):11392.

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