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FastDigest 限制性内切酶——Thermo Scientific

  • 品牌: Thermo
  • 产品货号: FD系列产品
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FastDigest 限制性内切酶——Thermo Scientific

One buffer for 176 enzymes. It's that easy.

所有176种酶均使用一种统一缓冲液。酶切就是如此简单。

Thermo Scientific FastDigest 限制性内切酶是一套用于快速酶切的高级内切酶,具有如下优势:

  • 在5-15分钟内完成酶切

  • 缓冲液与下游应用100%兼容

  • 酶切后可直接上样进行凝胶电泳











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FastDigest 产品系列是目前业内最丰富的限制性内切酶产品系列之一。在酶学领域数十年的专业积累、丰富的同裂酶选择、由我们顶级生产设施提供的高纯度酶生产能力,共同助力打造出首款使用统一缓冲液体系的限制性内切酶系统。


FastDigest 限制性内切酶的优势

 FastDigest 限制性内切酶传统限制性内切酶
缓冲液体系一种统一缓冲液多达20种缓冲液
双重/多重限制性酶切无拘无束——所有176种酶均使用一种统一缓冲液,且在其中均具有100%活性受缓冲液兼容性限制
反应时间5-15分钟1小时至过夜
酶切后可直接上样进行凝胶电泳
下游实验应用100%兼容缓冲液部分兼容
星号活性
活性定义在 FastDigest 缓冲液中,1 μL FastDigest 酶可在5至15分钟内切割 1 μg 底物 DNA在酶的最佳缓冲液中,1单位酶可在60分钟内水解 1 μg λDNA

缓冲液具有100%活性

FastDigest绿色缓冲液和Thermo Scientific FastDigest缓冲液是我们专利的酶切缓冲液,对所有FastDigest限制性内切酶都具有100%活性。该缓冲体系可利用任意限制酶组合实现双重和多重酶切。无需连续酶切或更换缓冲液。

5分钟内在FastDigest绿色缓冲液中完成单重、双重和三重酶切

5分钟内在FastDigest绿色缓冲液中完成单重、双重和三重酶切

5分钟质粒DNA酶切比较:

泳道 M:Thermo Scientific GeneRuler Express 分子量标准(

泳道1:对照,未酶切的质粒 DNA

泳道2:FastDigest EcoRI

泳道3:FastDigest EcoRI和FastDigest KpnI

泳道4:FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI


缓冲液与下游实验应用100%兼容

DNA/RNA修饰酶,如连接酶、磷酸酶、激酶和嗜温DNA聚合酶在FastDigest和FastDigest绿色缓冲液中具有100%活性。因此,在下游应用中使用的酶可以直接加到FastDigest反应混合物中。不需要缓冲液更换或纯化步骤。

DNA/RNA 修饰酶在FastDigest绿色缓冲液/FastDigest缓冲液中的活性
DNA 聚合酶 I,大肠杆菌100%
Klenow 片段100%
Klenow 片段 (exo-)100%
T4 DNA 聚合酶100%
T7 DNA 聚合酶100%
T4 DNA 连接酶*75–100%
FastAP 热敏碱性磷酸酶100%
T4 多聚核苷酸激酶100%

* T4 DNA连接酶活性需要0.5 mM ATP。


在5-15分钟内完成酶切

使用一种统一缓冲液在5-15分钟内完成双重和多重酶切:

  • 节省时间和精力,提高酶切通量

  • 所有种类的DNA模板都提供相应的酶切时间(质粒DNA、PCR产物、基因组DNA)。

  • 所有模板都不需要酶切过夜。

  • 反应时间短,无星号活性。

常规限制性内切酶
连续酶切
FastDigest 限制性内切酶
一种反应混合物
Apal的反应体系构建约2分钟FastDigest ApaI和XhoI的反应体系构建约2分钟
孵育60分钟孵育5分钟
Xhol的反应体系构建约2分钟
孵育60分钟
总时间>2小时总时间 7分钟

酶切后可直接进行凝胶电泳

5分钟内在FastDigest绿色缓冲液中完成单重、双重和三重酶切

基于方便性考虑,我们开发了FastDigest绿色缓冲液,其与FastDigest无色缓冲液具有同样的性能,但可将酶切反应混合物直接上样进行凝胶电泳。10X FastDigest绿色缓冲液包含密度试剂和两种示踪染料,从而可以实现直接上样电泳。蓝色染料在1%琼脂糖凝胶中的迁移率与3-5 kb DNA片段接近,并在424 nm时出现激发峰;而黄色染料在1%琼脂糖凝胶中的迁移速度稍快于10 bp DNA片段,并在615nm时出现激发峰。

FastDigest 绿色缓冲液

含有FastDigest Green绿色缓冲液的反应混合物:

泳道1:电泳前,上样至凝胶孔

泳道2:电泳后分离


反应时间短,无星号活性

FastDigest酶与FastDigest(绿色)缓冲液结合使用,以消除星号活性:

  • 反应时间短(5-15分钟),无需长时间消化

  • 统一缓冲液,具有适用于所有酶的最佳pH和盐浓度

  • 优化的酶和甘油浓度

使用常规限制性内切酶,在较长的反应时间、高酶浓度和高甘油浓度、高 pH 值或低离子强度情况下,可能表现出星号或“松弛”活性。FastDigest 酶很好的解决了所有这些问题,可在5分钟内实现单重、双重甚至三重酶切,无任何星号活性出现。

5分钟内在FastDigest绿色缓冲液中完成单重、双重和三重酶切

5分钟内完成质粒DNA的单重和双重酶切,无星号活性迹象

5分钟质粒DNA酶切比较:

泳道1:FastDigest SmaI

泳道2:FastDigest EcoRI

泳道3:FastDigest SmaI 和 FastDigest EcoRI 双酶切

泳道 M:GeneRuler 1 kb Plus DNA 分子量标准(

泳道 C:对照,未酶切的质粒 DNA

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